陰道內(nèi)未檢出DNA可能由樣本采集不當(dāng)、檢測(cè)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、精液量過(guò)少、陰道環(huán)境破壞、檢測(cè)技術(shù)局限等因素引起。
1、樣本采集問(wèn)題：陰道內(nèi)DNA提取需規(guī)范采集宮頸分泌物或陰道后穹窿樣本，使用無(wú)菌拭子旋轉(zhuǎn)刮取黏膜細(xì)胞。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致細(xì)胞脫落不足，建議由專(zhuān)業(yè)人員使用專(zhuān)用采樣套裝，避開(kāi)月經(jīng)期和沖洗后48小時(shí)內(nèi)采集。
2、降解時(shí)間影響：精液DNA在陰道內(nèi)留存時(shí)間受陰道pH值、酶活性及分泌物影響。酸性環(huán)境pH3.8-4.5中，精子DNA通常在12-72小時(shí)降解，超過(guò)窗口期可能無(wú)法檢出。性行為后立即檢測(cè)可提高檢出率。
3、精液參數(shù)異常：少精癥精液量＜1.5ml或無(wú)精癥患者，精液中精子數(shù)量低于檢測(cè)閾值。這類(lèi)情況需結(jié)合精液分析報(bào)告，必要時(shí)采用Y染色體STR檢測(cè)等敏感技術(shù)。
4、陰道微生態(tài)改變：頻繁灌洗、使用殺精劑或陰道炎如細(xì)菌性陰道病會(huì)破壞精子完整性。乳酸桿菌過(guò)度增殖產(chǎn)生的過(guò)氧化氫，或滴蟲(chóng)性陰道炎的蛋白酶均可加速DNA分解。
5、檢測(cè)方法局限：常規(guī)STR檢測(cè)需200-400個(gè)細(xì)胞，微量DNA需采用全基因組擴(kuò)增或下一代測(cè)序技術(shù)。陳舊樣本可嘗試線(xiàn)粒體DNA檢測(cè)，但需排除混合樣本干擾。
日常保持外陰清潔但避免陰道沖洗，性行為后6小時(shí)內(nèi)就診可保留檢測(cè)證據(jù)。穿棉質(zhì)內(nèi)褲維持pH平衡，急性炎癥期需先治療感染。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)規(guī)范樣本運(yùn)輸流程，冷藏保存不超過(guò)72小時(shí)，采用硅膠膜法提取可提高微量DNA捕獲率。
