免疫組化檢查并非100%準(zhǔn)確，其準(zhǔn)確性主要受抗體特異性、組織處理質(zhì)量、病理醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)、技術(shù)操作規(guī)范及結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)等因素影響。
1、抗體特異性：
抗體與靶抗原結(jié)合的特異性是免疫組化準(zhǔn)確性的核心。部分抗體可能與非靶抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。例如CD20抗體在B細(xì)胞淋巴瘤診斷中特異性較高，但某些活化T細(xì)胞也可能弱表達(dá)。抗體質(zhì)量差異、批次穩(wěn)定性及稀釋濃度不當(dāng)均會(huì)影響檢測(cè)可靠性。
2、組織處理質(zhì)量：
組織固定不及時(shí)或甲醛固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致抗原表位遮蔽。脫水不徹底、石蠟包埋溫度過(guò)高可能破壞抗原性。骨組織脫鈣處理不當(dāng)或活檢組織過(guò)小＜1cm時(shí)，抗原丟失風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，可能造成假陰性。
3、病理醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)：
判讀需要結(jié)合形態(tài)學(xué)與免疫表型綜合分析。低分化腫瘤可能出現(xiàn)異常表達(dá)，如肺腺癌表達(dá)TTF-1的同時(shí)異常表達(dá)p40。經(jīng)驗(yàn)不足可能導(dǎo)致對(duì)弱陽(yáng)性、異質(zhì)性表達(dá)的誤判，微小轉(zhuǎn)移灶＜2mm也易被遺漏。
4、技術(shù)操作規(guī)范：
抗原修復(fù)條件pH值、溫度時(shí)間不當(dāng)會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度。自動(dòng)染色儀管道污染可能造成假陽(yáng)性，而顯色時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致假陰性。內(nèi)部質(zhì)控樣本如正常扁桃體組織對(duì)照缺失時(shí)，無(wú)法驗(yàn)證檢測(cè)體系可靠性。
5、結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)：
不同實(shí)驗(yàn)室采用的陽(yáng)性閾值如1%vs30%腫瘤細(xì)胞著色存在差異。HER2免疫組化2+病例必須通過(guò)FISH驗(yàn)證，而PD-L1檢測(cè)需嚴(yán)格遵循特定評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如TPS≥1%。部分標(biāo)志物如Ki-67的臨界值尚無(wú)國(guó)際共識(shí)。
建議結(jié)合臨床表現(xiàn)和其他檢查綜合判斷免疫組化結(jié)果。對(duì)于關(guān)鍵診斷標(biāo)志物如ALK、ROS1，應(yīng)采用兩種不同克隆號(hào)抗體驗(yàn)證。特殊病例建議提交三級(jí)醫(yī)院病理科會(huì)診，必要時(shí)補(bǔ)充分子檢測(cè)?；颊呖杀Ａ舭灼詡鋸?fù)檢，病理報(bào)告應(yīng)注明所用抗體克隆號(hào)及檢測(cè)平臺(tái)信息。日常保持健康生活方式有助于降低腫瘤發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，定期體檢能早期發(fā)現(xiàn)病變。
