PCR檢測(cè)是一種分子生物學(xué)技術(shù)，全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)Polymerase Chain Reaction，主要用于擴(kuò)增特定DNA片段。該技術(shù)通過模擬DNA自然復(fù)制過程，在體外快速合成目標(biāo)基因序列，具有高靈敏度、高特異性和高效率的特點(diǎn)。
PCR檢測(cè)的核心步驟包括變性、退火和延伸三個(gè)循環(huán)階段。在95℃高溫下，雙鏈DNA解旋為單鏈；隨后降溫至50-65℃，引物與目標(biāo)序列特異性結(jié)合；最后在72℃條件下，DNA聚合酶沿模板合成新鏈。經(jīng)過30-40次循環(huán)后，目標(biāo)DNA片段可擴(kuò)增數(shù)百萬倍。
該技術(shù)主要應(yīng)用于病原體檢測(cè)如新冠病毒、乙肝病毒、遺傳病診斷、親子鑒定、法醫(yī)物證分析等領(lǐng)域。在傳染病防控中，實(shí)時(shí)熒光定量PCRqPCR能同步完成擴(kuò)增和檢測(cè)，通過熒光信號(hào)變化實(shí)現(xiàn)病原體核酸的定量分析，檢測(cè)限可達(dá)1-10拷貝/毫升。
樣本類型包括咽拭子、血液、組織等，檢測(cè)時(shí)長通常為2-4小時(shí)。需在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作，防止氣溶膠污染。假陰性結(jié)果可能源于樣本采集不當(dāng)、病毒變異或抑制劑存在，假陽性多由實(shí)驗(yàn)室污染導(dǎo)致。
特殊情況下需采用數(shù)字PCRdPCR或逆轉(zhuǎn)錄PCRRT-PCR等衍生技術(shù)。目前PCR技術(shù)已發(fā)展至第三代，如微流控芯片PCR可在30分鐘內(nèi)完成檢測(cè)。該技術(shù)仍是分子診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但需結(jié)合臨床癥狀和其他檢查綜合判斷。
